Harkov Guberniyası (Rusça: Харьковская губернія Harkovskaya guberniya; Ukraynaca: Харківська губернія Harkivska huberniya), Rus İmparatorluğu'nun guberniyalarından biriydi. Guberniya, günümüz Ukrayna'nın doğusunu kapsamaktaydı. Guberniyanın merkezi Harkov idi.
Guberniya, 1835 yılında Sloboda Ukrayna Guberniyası'nın yerine kurulmuştur. 1925 yılında diğer guberniyalar gibi lağvedilerek yerini okruglara ve daha sonra oblastlara bıraktı.